10kd超滤离心管？离心管10kd的10kd是指截留率，单位越大，超滤得到的物质分子也越大的。关于10kd超滤离心管以及10kd超滤离心管等问题，锦燕网将为你整理以下的生活知识：

10kd超滤离心管怎么用

　　10kd超滤离心管怎么用如下;

　　蛋白浓缩和换Buffer通常使用的超滤管，常用Millipore的Amicon-Ultra-15超滤管(MWCO10kD)。也有其它型号的、不同体积大小和MWCO超滤管可选，视目的蛋白的分子量与浓缩前体积、浓缩目标体积而定。可重复使用。

　　1、选择合适的超滤管，主要考虑MWCO和浓缩体积，通常应截留分子量不应大于目的蛋白分子量的1/3，比如目的蛋白分子量为35kDa，就可以选择10kDa截留分子量的超滤管。若目的蛋白分子量为10kD左右，则可以用截留分子量3kD的超滤管。

　　2、新买来的超滤是干燥的，使用前加入MilliQ水，水量完全过膜，冰浴或冰箱里预冷几分钟。然后将水倒出，即可加入蛋白液，加入的多少，以不超过管顶的白线为准。操作要轻，加入蛋白液前，超滤管需要插在冰上预冷。

　　3、平衡。质量和重心二者都要达到平衡。注意转速和加速度不可太快，否则直接损坏超滤膜。开始离心超滤(离心机预冷至4度)。膜与转轴的方向根据说明书调整(角转离心机的情况是膜与轴垂直)。在实际使用中，一般转速开的比说明书里的要低，这样可以延长离心管的使用寿命。

10kd超滤离心管

　　离心管10kd的10kd是指截留率，单位越大，超滤得到的物质分子也越大。

　　截留率为膜分离技术的一项重要指标，因计算公式不同，而得不同数值。

　　离心管，管状试样容器，可带密封盖或压盖。

　　塑料离心管都有管盖，它的作用是防止样品外泄，尤其是用于有放射性或强腐蚀性的样品时防止样品外泄是很重要的一点；管盖还有一个作用是防止样品挥发以及支撑离心管，防止离心管变形。

　　在挑选这一点的时候还要注意检查管盖是否严密，在试验时能否盖严，以达到倒置不漏液。

超滤离心管怎么使用

　　蛋白浓缩和换Buffer通常使用的超滤管，常用Millipore的Amicon-Ultra-15超滤管（MWCO10kD）。

　　也有其它型号的、不同体积大小和MWCO超滤管可选，视目的蛋白的分子量与浓缩前体积、浓缩目标体积而定。

　　可重复使用。

　　1、选择合适的超滤管，主要考虑MWCO和浓缩体积，通常应截留分子量不应大于目的蛋白分子量的1/3，比如目的蛋白分子量为35kDa，就可以选择10kDa截留分子量的超滤管。

　　若目的蛋白分子量为10kD左右，则可以用截留分子量3kD的超滤管。

　　2、新买来的超滤是干燥的，使用前加入MilliQ水，水量完全过膜，冰浴或冰箱里预冷几分钟。

　　然后将水倒出，即可加入蛋白液，加入的多少，以不超过管顶的白线为准。

　　操作要轻，加入蛋白液前，超滤管需要插在冰上预冷。

　　3、平衡。

　　质量和重心二者都要达到平衡。

　　注意转速和加速度不可太快，否则直接损坏超滤膜。

　　开始离心超滤（离心机预冷至4度）。

　　膜与转轴的方向根据说明书调整（角转离心机的情况是膜与轴垂直）。

　　在实际使用中，一般转速开的比说明书里的要低，这样可以延长离心管的使用寿命。

　　4、当浓缩到剩下1ml时，【取50ul国产Bradford溶液，加入10ul流穿，看有没变蓝色，以此判断超滤管是否漏掉蛋白。

　　如果管漏了，将上层和流穿重新倒入新管中开始超滤。

　　要精确判断是否漏管，用5mg/ml的BSA离心10min，再取流穿，跑蛋白胶或Bradford粗测】，继续加入剩下的蛋白液浓缩（在冰上操作，防止蛋白受热），直到所有浓缩液都加完为止。

　　离心过程中注意是否发生蛋白沉淀，导致堵管。

　　若发生沉淀，要确定沉淀的具体原因，是蛋白浓度过高还是Buffer不合适；前者可用多根超滤管同时超滤，降低浓度的办法解决，后者的方法是换不同的Buffer，直到蛋白不发生沉淀为止。

　　5、前面几步用以浓缩蛋白，如果要换Buffer，在总蛋白液浓缩至1ml左右的时候，轻轻加入新的Buffer（经0.22um超滤膜超滤），再浓缩至1ml左右，连续三次，最后一次的浓缩终体积根据需要的蛋白浓度而定，一般不多于500ul，也有浓缩至200ul以内的情况。

　　按照每次至少10倍左右的体积浓缩算，三次达到1000倍以上，基本上可以达到换buffer的目的。

　　6、取出最终蛋白浓缩液的操作在冰上操作，用黄枪头（200ul）取，轻轻顺着边缘插入枪头，轻轻吹打、混匀蛋白液，注意不要碰到超滤膜，然后吸取浓缩液，每次吸接近200ul，直到吸完。

　　管底剩下的最后一点浓缩液不必吸取，否则难度太大，有可能损坏超滤膜。

　　最后加入MilliQ水到超滤管中，没过超滤膜，防止膜失水变干。

　　7、以下是处理超滤管，重复利用超滤管的步骤。

　　8、倒出超滤管里的水，用milliQ水轻轻润洗几次，【若管底有可见的蛋白沉淀，可以先加入水，然后用枪头吹打，注意不要碰到膜，吹打至沉淀悬起，然后倒掉，不可用自来水猛冲】然后加入0.2M的NaOH溶液，室温放置20min，期间平衡超滤管。

　　再离心10min。

　　倒出残留的NaOH溶液，将管芯浸入MilliQ水的烧杯(1或2L)中,放置几个小时,再换新的水,放置几个小时，不断稀释NaOH浓度。

　　50ml管和盖子用自来水洗，内壁再用MilliQ水洗干净。

　　9、取出浸没的管芯，加至接近满的MilliQ水，50ml管也加满MilliQ水，将管芯慢慢放入50ml

　　离心管，排出部分水，然后盖上盖子，放4度保存，直到下次使用。

　　一般来说，按照上述步骤和注意事项，每根管用三四年不会坏。